CCK8中文说明书
在现代生物实验中,CCK8试剂是一种广泛使用的细胞活性检测试剂。它以其高灵敏度和便捷的操作流程赢得了科研人员的青睐。本文将详细介绍CCK8试剂的使用方法及注意事项,帮助用户更好地掌握这一工具。
一、产品概述
CCK8(Cell Counting Kit-8)是一种基于WST-8的细胞增殖和细胞毒性检测试剂。其原理是通过细胞代谢过程中产生的酶将WST-8转化为具有高度水溶性的橙黄色甲臜产物,该产物的生成量与活细胞的数量成正比。因此,可以通过测定450nm波长处的吸光度来评估细胞的活性。
二、操作步骤
1. 准备样品
将待测细胞接种于96孔板或其他适合的培养容器中,确保每孔细胞数量一致。
2. 加入CCK8试剂
每孔加入10μL CCK8试剂,轻轻混匀。避免剧烈振荡以防止气泡产生。
3. 孵育
将样品置于37℃、5% CO₂条件下孵育1-4小时,具体时间可根据实验需求调整。
4. 测量吸光度
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度值。背景对照孔应设置为0μL CCK8试剂。
三、注意事项
- 试剂储存
CCK8试剂需避光保存于2-8℃环境中,避免反复冻融。
- 细胞密度控制
不同细胞类型对CCK8的反应敏感度不同,建议先进行预实验确定最佳细胞密度。
- 孵育时间
过短或过长的孵育时间可能影响结果准确性,请根据实验需要优化条件。
四、应用领域
CCK8试剂适用于多种生物学研究,包括但不限于:
- 药物筛选
- 细胞毒性评估
- 增殖能力分析
- 抗体功能验证
通过以上介绍,希望用户能够熟练掌握CCK8试剂的使用方法,并将其应用于实际研究中。如有任何疑问,请参考产品附带的详细说明书或联系技术支持。