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lb培养基的配方及制作过程

2025-10-04 18:39:44

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2025-10-04 18:39:44

lb培养基的配方及制作过程】LB培养基(Luria-Bertani Medium)是微生物学实验中最常用的液体或固体培养基之一,广泛应用于大肠杆菌等细菌的培养。其配方简单、营养丰富,能够支持多种微生物的生长。以下是LB培养基的常见配方及其制作过程的总结。

一、LB培养基的基本配方

成分 含量(g/L) 说明
胰蛋白胨 10 g 提供氮源和氨基酸
酵母提取物 5 g 提供维生素、矿物质和生长因子
氯化钠 10 g 维持渗透压平衡
琼脂(用于固体培养基) 15–20 g 固定培养基形态
蒸馏水 1 L 溶解各成分

> 注:如果制备的是液体培养基,则无需添加琼脂。

二、LB培养基的制作过程

1. 称量材料

根据所需体积,按比例称取胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠以及琼脂(如需)。

2. 溶解

将称好的材料加入适量蒸馏水中,搅拌至完全溶解。注意避免结块。

3. 调整体积

补加蒸馏水至最终所需体积(通常为1 L),并充分混匀。

4. 灭菌处理

将溶液倒入锥形瓶或烧杯中,用封口膜封口,放入高压灭菌器中,在121℃下灭菌15–20分钟。

5. 冷却与分装

灭菌后将培养基冷却至约50–60℃(适合倒平板),然后倒入无菌培养皿或试管中,待其凝固后即可使用。

6. 储存

制作完成的培养基应置于4℃冰箱中保存,避免阳光直射,一般可在数天内使用。

三、注意事项

- 配方可根据实验需求进行微调,例如添加抗生素或选择性物质。

- 灭菌过程中应确保压力和时间足够,以保证彻底杀菌。

- 若用于固体培养基,琼脂的用量应根据实际需要调整,过高可能导致培养基过硬,影响菌落生长。

通过以上步骤,可以高效、稳定地制备出适用于实验室的LB培养基,为后续的微生物实验提供良好的基础条件。

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